| Titre : | Contribution à la mise au point de la transformation génétique sur les individus d'une famille F1 Populus deltoides x P. trichocarpa, afin de valider un gène candidat pour la résistance à la rouille (Melampsora larici-populina) |
| Auteurs : | A. Courteille, - Auteur ; INRA, Unité d'amélioration, génétique et physiologie forestières, Orléans (FRA), - Auteur ; ENSAIA Ecole Nationale Supérieure d'Agronomie et des Industries Alimentaires, Nancy (FRA), - Auteur |
| Type de document : | thèse/mémoire |
| Année de publication : | 2009 |
| Format : | 35 p. |
| Langues: | = Français |
| Mots-clés: | POPULUS DELTOIDES ; POPULUS TRICHOCARPA ; AGROBACTERIUM TUMEFACIENS ; MELAMPSORA LARICI-POPULINA ; TRANSFORMATION GENETIQUE ; ROUILLE FOLIAIRE ; RESISTANCE AUX MALADIES ; RESISTANCE A LA ROUILLE |
| Résumé : |
Le principal ravageur des peupleraies cultivées, la rouille foliaire Melampsora larici-populina, contourne les résistances totales des cultivars sélectionnés depuis une vingtaine d'années. Un facteur de résistance partielle (Rus) est en cours de clonage positionnel au sein d'une famille F1 de
peupliers issue d'un croisement interspécifique (Populus deltoides x P. trichocarpa). La transformation génétique constitue une étape nécessaire pour valider la fonctionnalité du gène candidat sous-jacent. Dans ce contexte, l'objectif de ce travail était de mettre au point un protocole de transformation génétique sur les clones issus de cette famille F1, connus pour être naturellement récalcitrants à l'infection par Agrobacterium tumefaciens. Pour cela, des modifications du protocole de routine utilisé sur le clone INRA 717-184 (P. tremula x P. alba) ont été apportées. L'allongement de la durée de préculture et l'ajout d'acétosyringone dans le milieu de trempage n'ont pas amélioré le rendement de transformation. La coaction du thidiazuron et du pluronic F-58 a en revanche permis d'initier la régénération de bourgeons pour certains clones. Une stratégie de clonage a été mise en place dans le but d'introduire les séquences issues du clonage positionnel de Rus dans un vecteur binaire. La construction plasmidique obtenue pourra être utilisée pour la transformation génétique des individus de la famille F1 afin de valider la fonction du gène. The main pest for poplar plantations, the Melampsora larici-populina rust fungus, has bypassed qualitative resistance of all selected cultivars for the last twenty years. The positional cloning of a quantitative resistance factor (Rus) is being performed on a F1 progeny issued from an interspecific cross (Populus deltoides x P. trichocarpa). Genetic transformation appears as an essential step for the functional validation of the underlying candidate gene. In this context, the objective of this study was to develop a genetic transformation protocol on the clones from this F1 familiy, known for being naturally recalcitrant to Agrobacterium tumefaciens infection. For this purpose, several modifications of the routine protocol used on the INRA 717-184 clone (P. tremula x P. alba) have been done. The extension of the preculture period and the addition of acetosyringone in the cocultivation medium did not improve the transformation rate. The coaction of thidiazuron and pluronic F-68 induced bud regeneration for several clones. A cloning strategy has been developed in order to introduce the cloned sequences from the positional cloning of Rus into a binary vector. The plasmid construction will allow the genetic transformation of the individuals from the F1 progeny to validate the gene function. |
| Diplôme : | Master 2 Recherche FAGE - AFEE |
Exemplaires (2)
| Centre | Localisation | Section | Cote | Statut | Disponibilité | Département |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Val de Loire | AGPF | Thèses/Mémoires | DOCOR -M COU | Empruntable | Disponible pour le prêt | |
| Val de Loire | AGPF | Thèses/Mémoires | RF AMO-M COU (VJ) | Empruntable | Disponible pour le prêt |
